目錄:匯智和源生物技術(shù)（蘇州）有限公司>>2 遺傳毒性試驗(yàn)產(chǎn)品>>體外染色體畸變試驗(yàn)產(chǎn)品>> 221011體外染色體畸變試劑盒（CA試驗(yàn)）
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| CAS | 無 | 純度 | 無 |
|---|---|---|---|
| 分子量 | 無 | 分子式 | 無 |
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5mL×20 體系/盒 |
| 貨號(hào) | 221011 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
| 主要用途 | 遺傳毒性試驗(yàn),體外染色體畸變試驗(yàn) |
體外染色體畸變試驗(yàn)
體外染色體畸變試驗(yàn)的目的是檢測培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞染色體結(jié)構(gòu)畸變,。結(jié)構(gòu)畸變可份為染色體型和染色單體型。大多數(shù)化學(xué)致突變物誘導(dǎo)染色單體型突變,，但染色體型突都也可發(fā)生,。多倍體增加表明受試物可導(dǎo)致染色體數(shù)目畸變。但是,，本方法不用于檢測數(shù)目畸變,。染色體突變和相關(guān)事件可以引起很多人類遺傳性疾病，并且有證據(jù)表明,，引起體胡魔癌基因和抑癌基因改變的染色體突變以及相關(guān)事件,，與人類和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的腫瘤發(fā)生有關(guān),。體外柴色體畸變試驗(yàn)可應(yīng)用于已建立的細(xì)胞系、細(xì)胞株或原代細(xì)胞培養(yǎng),，根據(jù)培養(yǎng)生長能力,、核型的穩(wěn)定性、染色體數(shù)目,、染色體差異以及染色體響變的自發(fā)頻率選擇合適的細(xì)胞,。
體外染色體畸變試劑盒 IPHASE in vitro mammalian chromosome aberration test kit (CHL)
北京匯智泰康醫(yī)藥技術(shù)有限公司針對染色體畸變試驗(yàn)開發(fā)染色體畸變試驗(yàn)試劑盒， 本試劑盒省去了陽性底物成分準(zhǔn)備,、誘導(dǎo) S9 制備，可以直接使用,，大大縮短了實(shí)驗(yàn)周期,；試劑盒各成分均經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量檢測，無雜菌污染,，誘導(dǎo) S9 活性均符合染色體畸變試驗(yàn)要求,，實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確、可靠,、重現(xiàn)性高,。染色體畸變試驗(yàn)試劑盒應(yīng)用廣泛，可進(jìn)行食品,、化學(xué)品,、農(nóng)藥、消毒劑,、食品添加劑,、藥物殘留、化妝品,、容器與包裝材料等多個(gè)方面的遺傳毒理學(xué)檢測,。
體外染色體畸變試劑盒使用說明書
【試驗(yàn)原理】
在加入和不加入代謝活化系統(tǒng)的條件下，使培養(yǎng)的哺乳類動(dòng)物細(xì)胞暴露于受試物中,，用中期分裂相阻斷劑秋水仙素進(jìn)行處理,，使細(xì)胞停止在中期分裂相，隨后收獲細(xì)胞,、制片,、染色并分析受試物是否誘發(fā)體外培養(yǎng)的哺乳類細(xì)胞染色體畸變，從而評(píng)價(jià)受試物致突變的可能性,。
【產(chǎn)品組成】
| 組分 | 規(guī)格 | 數(shù)量 | 使用說明 | 保存條件 |
| S9復(fù)合物 | 2mL | 1 | / | -70℃ |
| 磷酸鹽緩沖液 | 10 mL | 1 | 使用前混勻 | |
| （CP） | 0.5 mL | 1 | 800 μg/mL,，使用前混勻 | |
| 四列毒C（MMC） | 0.5mL | 2 | 20 μg/mL，使用前混勻 | |
| 秋水仙素 | 1.5 mL | 1 | 20 μg/mL,，使用前混勻 | |
| 中國倉鼠肺細(xì)胞（CHL） | 1 mL | 1 | / |
【產(chǎn)品使用說明】
1,、細(xì)胞復(fù)蘇
從-70冰箱取出細(xì)胞,，于37℃水浴融化，1000rpm離心5min,，棄上清,，用含10%牛血清RPMI 1640培養(yǎng)液（RPMI-10）中重懸細(xì)胞；1000rpm再次離心5min,，棄上清,，用RPMI-10重懸后接種于細(xì)胞瓶中培養(yǎng)。
2,、細(xì)胞準(zhǔn)備
將處于對數(shù)生長期,，貼壁生長良好的CHL細(xì)胞用0.25 %（ Trypsin-EDTA）消化處理制成細(xì)胞懸液，5 mL/瓶接種于25cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶中,，于37℃,、5%二氧化碳培養(yǎng)箱中加濕培養(yǎng)約24 h-48h。
3,、染毒處理
吸去培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液,，加入一定濃度的受試物、S9混合液（不加S9混合液時(shí),，需用培養(yǎng)液補(bǔ)足）以及一定量不含血清的培養(yǎng)液,，于培養(yǎng)箱中處理6h。在收獲細(xì)胞前4 h加入細(xì)胞分裂中期阻斷劑秋水仙素溶液（終濃度為0.2 mg/mL）,。具體試驗(yàn)方案見下表：
1）S9混合液配制
| S9混合液配制（10mL） | ||
| S9復(fù)合物 | 1.6mL | 現(xiàn)配現(xiàn)用,。使用過程中，于冰浴條件下保存,。 試驗(yàn)結(jié)束后,，剩余溶液應(yīng)丟棄，不可重復(fù)使用,。 |
| 磷酸鹽緩沖液 | 8.4mL | |
2）推薦染毒培養(yǎng)體系配制方案（以3個(gè)受試物劑量組為例）
| 處理方式 | 組別 | 培養(yǎng)液體積（mL） | S9混合液體積（mL） | 受試物體積（mL） | 溶劑體積（mL） | 陽性對照體積（mL） | |
| CP | MMC | ||||||
| 活化 | 陽性對照 | 4.45 | 0.5 | / | / | 0.05 | / |
| 劑量1 | 4.45 | 0.5 | 0.05 | / | / | / | |
| 劑量2 | 4.45 | 0.5 | 0.05 | / | / | / | |
| 劑量3 | 4.45 | 0.5 | 0.05 | / | / | / | |
| 溶劑對照 | 4.45 | 0.5 | / | 0.05 | / | / | |
| 不活化 | 陽性對照 | 4.95 | / | / | / | / | 0.05 |
| 劑量1 | 4.95 | / | 0.05 | / | / | / | |
| 劑量2 | 4.95 | / | 0.05 | / | / | / | |
| 劑量3 | 4.95 | / | 0.05 | / | / | / | |
| 溶劑對照 | 4.95 | / | / | 0.05 | / | / | |
注：24小時(shí)染毒所用陽性底物需稀釋2倍后加入0.05 mL,。
4、收獲細(xì)胞及制片
用0.25%的溶液消化細(xì)胞,，加入0.075mol/路化甲溶液進(jìn)行低滲處理,，固定液（甲醇：斌戳酸=3：1）進(jìn)行固定并滴片，用吉姆薩染液染色,，中性樹膠封片,，并于油鏡下進(jìn)行閱片，記錄畸變細(xì)胞的坐標(biāo)位置及畸變類型,，具體操作方法參照國標(biāo)方法進(jìn)行,。
5、畸變類型分析及結(jié)果判定
結(jié)果分析及判定可參照：473 體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞染色體畸變試驗(yàn),，《化學(xué)品測試方法·健康效應(yīng)卷》（第二版）,，2013年,，(ISBN：978-7-5111-1476-1)。
【注意事項(xiàng)】
1.實(shí)驗(yàn)前請自行準(zhǔn)備RPMI 1640培養(yǎng)液,、牛血清,、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、24孔細(xì)胞培養(yǎng)板,、滅菌槍頭,、無菌移液管、二氧化碳培養(yǎng)箱,、振蕩器,、15、50mL離心管等,，所有耗材需做無菌處理,。
2.實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在符合細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)要求的環(huán)境下進(jìn)行。
匯智泰康是一家位于中美兩地的生物醫(yī)藥合同研發(fā)機(jī)構(gòu),，整合中美兩地的藥物研發(fā)技術(shù)服務(wù)平臺(tái),，基于AAALAC,、GLP,、ISO/IEC 17025實(shí)驗(yàn)室認(rèn)證，面向很多企業(yè)及研發(fā)機(jī)構(gòu)提供分析化學(xué),、DMPK,、藥理藥效、生物學(xué),、以及毒理安全性評(píng)價(jià)產(chǎn)品與服務(wù),。
主要產(chǎn)品：
體外藥物代謝產(chǎn)品
Ⅰ相代謝穩(wěn)定性試劑盒
Ⅱ相代謝穩(wěn)定性試劑盒
CYP450酶代謝表型研究試劑盒
不同種屬肝微粒體，肝S9
重組酶,，標(biāo)準(zhǔn)品,，孵育系統(tǒng)等
遺傳毒性產(chǎn)品
Ames試劑盒
體外染色體畸變試驗(yàn)試劑盒
TK基因突變試驗(yàn)試劑盒
HPGRT基因突變試劑盒
彗星試驗(yàn)試劑盒
誘導(dǎo)大鼠肝S9等
空白生物基質(zhì)
空白血清：食蟹猴，恒河猴,，比格犬,，大鼠，小鼠,，豬,，兔
空白血漿：食蟹猴，恒河猴,，比格犬,，大鼠，小鼠,，豬,，兔
空白血：食蟹猴,，恒河猴，比格犬,，大鼠,，小鼠，豬,，兔
空白尿液：食蟹猴,，恒河猴，比格犬,，大鼠,，小鼠
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